Estandarización de una técnica de PCR múltiple para la detección de los serogrupos O157, O104 y “big six” de Escherichia coli productora de la toxina Shiga (STEC)

Authors

  • Patricia Acuña Universidad Nacional de Asunción, Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Departamento de Microbiología. Campus Universitario San Lorenzo, Paraguay
  • Melisa Florentín Universidad Nacional de Asunción, Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Departamento de Microbiología. Campus Universitario San Lorenzo, Paraguay
  • Natalia Rojas Universidad Nacional de Asunción, Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Departamento de Microbiología. Campus Universitario San Lorenzo, Paraguay
  • Fátima Rodríguez Universidad Nacional de Asunción, Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Departamento de Microbiología. Campus Universitario San Lorenzo, Paraguay
  • Rosa Guillén

DOI:

https://doi.org/10.18004/mem.iics/1812-9528/2019.017.02.71-076

Keywords:

STEC, O157, O104, serogrupos “big six”, PCR

Abstract

Los serogrupos O26, O45, O103, O104, O111, O121, O145 y O157 de STEC se relacionan con un elevado número de casos de SUH a nivel mundial, por lo que están incluidos dentro de las categorías de mayor riesgo para los humanos, según los criterios de autoridades alimentarias de Estados Unidos y Europa. El método convencional de identificación de antígenos O y H se realiza por aglutinación con antisueros de conejo. Este método además de ser muy costoso y laborioso, no se encuentra disponible en el país para empleo masivo. En este contexto, el objetivo de este estudio observacional descriptivo de corte transverso ha sido la estandarización de una técnica de PCR múltiple para la detección de estos 8 serogrupos, a fin de contar con un sistema de detección eficiente, sensible y con potencial de aplicación en la industria alimentaria. Se estandarizaron reacciones de PCR empleando como controles positivos cepas E. coli de referencia correspondientes a la totalidad de los serogrupos citados. Se obtuvieron productos de tamaños esperados para cada serogrupo, no se observaron amplificaciones cruzadas o falsos positivos. Esta técnica estandarizada podría representar una herramienta rápida y menos costosa que la técnica serológica, con la capacidad de ser aplicada a diferentes matrices, permitiendo la detección de estos serogrupos en aislados STEC de ganado en pie, fuentes de agua de consumo, alimentos e incluso en aislamientos clínicos asociados a enfermedades humanas.

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References

OMS. Informe de la OMS señala que los niños menores de 5 años representan casi un tercio de las muertes por enfermedades de transmisión alimentaria. Organización Mundial de la Salud. 2015.

Welinder-Olsson C, Kaijser B. Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC). Scand J Infect Dis 2005;37(6-7):405-16.

Riley LW, Remis RS, Helgerson SD, McGee HB, Wells JG, Davis BR, et al. Hemorrhagic colitis associated with a rare Escherichia coli serotype. N Engl J Med. 1983;308(12):681-5.

Marler Bill. Jack in the Box E. coli Outbreak – 25th Anniversary. Food Poisoning Outbreaks and Litigation: Surveillance and Analysis. 2017;8.

Watanabe Y, Ozasa K, Mermin JH, Griffin PM, Masuda K, Imashuku S, et al. Factory outbreak of Escherichia coli O157:H7 infection in Japan. Emerg Infect Dis 1999;5(3):424-8.

Jin M, Lang J, Shen Z-Q, Chen Z-L, Qiu Z-G, Wang X-W, et al. A Rapid Subtractive Immunization Method to Prepare Discriminatory Monoclonal Antibodies for Food E. coli O157:H7 Contamination. PLoS ONE 2012; 7(2).

«Big six» non-O157 Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) research materials. University Blvd. Manassas: American Type Culture Collection; 2014: 3. Report N°.: BA-1114-04.

Reports of Selected E. coli Outbreak Investigations. Centers for Disease Control and Prevention. 2017.

Karmali MA, Mascarenhas M, Shen S, Ziebell K, Johnson S, Reid-Smith R, et al. Association of genomic O island 122 of Escherichia coli EDL 933 with verocytotoxin-producing Escherichia coli seropathotypes that are linked to epidemic and/or serious disease. J Clin Microbiol 2003; 41(11):4930-40.

EFSA Panel on Biological Hazards (BIOHAZ). Scientific Opinion on VTEC-seropathotype and scientific criteria regarding pathogenicity assessment. EFSA J 2013; 11(4):106.

Asociación Rural del Paraguay. Introducción a Paraguay y su sector cárnico. ARP; 2017.

Guinée P a. M, Jansen WH, Wadström T, Sellwood R. Escherichia coli Associated with Neonatal Diarrhoea in Piglets and Calves. En: Laboratory Diagnosis in Neonatal Calf and Pig Diarrhoea. Springer, Dordrecht; 1981. 126-62.

Sánchez S, Llorente MT, Echeita MA, Herrera-León S. Development of Three Multiplex PCR Assays Targeting the 21 Most Clinically Relevant Serogroups Associated with Shiga Toxin-Producing E. coli Infection in Humans. PLoS ONE. 2015;10(1).

Monday SR, Beisaw A, Feng PCH. Identification of Shiga toxigenic Escherichia coli seropathotypes A and B by multiplex PCR. Mol Cell Probes. 2007; 21(4):308-11.

Ennis C, McDowell D, Bolton D j. The prevalence, distribution and characterization of Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) serotypes and virulotypes from a cluster of bovine farms. J Appl Microbiol. 2012;113(5):1238-48.

Banco Central del Paraguay. Reporte de Comercio Exterior. BCP; 2016: 19.

Nick. Top 20 World’s Largest Beef Exporters. Bizvibe Blog, 2017.

Sánchez-Prieto S, Herrera-León L, Llorente-Rodríguez MT, Herrera-León S. Infecciones por Escherichia coli diarreagénicos en España: ¿hay un antes y un después del brote de Alemania? Enfermedades Infecc Microbiol Clínica. 2014; 32(2):133-5.

Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Outbreak of Escherichia coli O157:H7 infections associated with drinking unpasteurized commercial apple juice--British Columbia, California, Colorado, and Washington, October 1996. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 1996;45(44):975.

Mitchell C. New FSIS Policy on the «Big Six» Takes Effect Today. Food Liability Law. 2012.

González D. 97% de la carne consumida en el mercado interno no posee control. Diario 5 días. 2011;1.

Published

2019-08-01

How to Cite

Acuña, P., Florentín, M., Rojas, N., Rodríguez, F., & Guillén, R. (2019). Estandarización de una técnica de PCR múltiple para la detección de los serogrupos O157, O104 y “big six” de Escherichia coli productora de la toxina Shiga (STEC). Memorias Del Instituto De Investigaciones En Ciencias De La Salud, 17(2), 71–76. https://doi.org/10.18004/mem.iics/1812-9528/2019.017.02.71-076

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