Detecção molecular de Anaplasma platys a partir de sangue capilar canino em papel de filtro
Palavras-chave:
Anaplasma platys, hematopatógeno, papel filtro, cPCR, cãoResumo
Devido à alta prevalência de Anaplasma platys em regiões tropicais, o presente estudo avaliou a utilidade do papel de filtro impregnado com sangue capilar canino como método alternativo para a detecção molecular de A. platys. Foram analisadas 101 amostras de DNA genômico extraídas de sangue seco impregnado em papel de filtro modificado. A extração do DNA foi realizada por meio de resinas de troca iônica (Chelex 100®) e um fragmento do gene p44 foi amplificado por cPCR. Os produtos da amplificação foram visualizados por eletroforese em gel de agarose a 1,5%. Os resultados mostraram que 9 das 101 amostras (8,91%) foram positivas para A. platys, evidenciando a presença do hemopatógeno na população canina analisada. Os resultados do estudo corroboram o uso do papel-filtro impregnado com sangue capilar como uma alternativa confiável e eficiente para a coleta, transporte e armazenamento de amostras sanguíneas no diagnóstico molecular de A. platys, contribuindo assim para a vigilância epidemiológica e o manejo clínico dessa infecção em populações caninas.
Downloads
Referências
Ahmed, H. A., MacLeod, E. T., Hide, G., Welburn, S. C., & Picozzi, K. (2011). The best practice for preparation of samples from FTA ® cards for diagnosis of blood borne infections using African trypanosomes as a model system. Parasites & Vectors, 4, 68. https://doi.org/10.1186/1756-3305-4-68
Auricchio, B., Anniballi, F., Fiore, A., Skiby, J.E., De Medici, D. (2013). Evaluation of DNA extraction methods suitable for PCR-based detection and genotyping of Clostridium botulinum. Biosecurity and Bioterrorism: Biodefense Strategy, Practice, and Science, 11(S1), S200–S206. https://doi.org/10.1089/bsp.2012.0082
Auricchio, B., Anniballi, F., Fiore, A., Skiby, J.E., De Medici, D. (2013). Evaluation of DNA extraction methods suitable for PCR-based detection and genotyping of Clostridium botulinum. Biosecurity and Bioterrorism: Biodefense Strategy, Practice, and Science, 11(S1), S200–S206. https://doi.org/10.1089/bsp.2012.0082
Breitschwerdt, E. B., Hegarty, B. C., Qurollo, B. A., Saito, T. B., Maggi, R. G., Blanton, L. S., & Bouyer, D. H. (2014). Intravascular persistence of Anaplasma platys, Ehrlichia chaffeensis, and Ehrlichia ewingii DNA in the blood of a dog and two family members. Parasites & Vectors, 7, 298. https://doi.org/10.1186/1756-3305-7-298
Breitschwerdt, E. B., Hegarty, B. C., Qurollo, B. A., Saito, T. B., Maggi, R. G., Blanton, L. S., & Bouyer, D. H. (2014). Intravascular persistence of Anaplasma platys, Ehrlichia chaffeensis, and Ehrlichia ewingii DNA in the blood of a dog and two family members. Parasites & Vectors, 7, 298. https://doi.org/10.1186/1756-3305-7-298
Dantas-Torres, F. (2008). Canine vector-borne diseases in Brazil. Parasites & Vectors, 1(1), 25. https://doi.org/10.1186/1756-3305-1-25
De la Fuente, J., Torina, A., Naranjo, V., Nicosia, S., Alongi, A., La Mantia, F., & Kocan, K. M. (2006). Molecular characterization of Anaplasma platys strains from dogs in Sicily, Italy. BMC Veterinary Research, 2(1), 24.
De Menezes Silveira, A., Menezes, G. M. M., Torquato Júnior, A. da S., Santos, A. L. da C., & Delfino, A. I. S. A. (2019). Survey of hemoparasitosis in dogs and cats at Dr. Vicente Borelli Veterinary Hospital - Aracaju-Sergipe. Pubvet Medicina Veterinaria y Zootecnia, 13(1), 1–5. https://doi.org/10.31533/pubvet.v13n01a260.1-5
Del Puerto, F., Pésole, D., Molina, S., Vera, K., Arias, M., Sosa, Ortiz, M. L., Fernández, J., & Garay, A. (2017). Identificación molecular del sexo en 9 especies de aves del Centro de Investigación en Animales Silvestres de la hidroeléctrica de ITAIPU, lado paraguayo. Memorias Del Instituto De Investigaciones En Ciencias De La Salud, 15(3), 89-92. https://revistascientificas.una.py/index.php/RIIC/article/view/1939
Harvey, N. D. (2021). How old is my dog? Identification of rational age groupings in pet dogs based upon normative age-linked processes. Frontiers in Veterinary Science, 8, 643085. https://doi.org/10.3389/fvets.2021.643085
Kumar, S., Stecher, G., Li, M., Knyaz, C., & Tamura, K. (2018). MEGA X: Molecular Evolutionary Genetics Analysis across computing platforms. Molecular Biology and Evolution, 35(6), 1547-1549. https://doi.org/10.1093/molbev/msy096
Landázuri Rafael, T. H., Carrazco, A., León, R., Vinueza, L., & Barragán, V. (2021). Optimización de un protocolo de extracción de ADN a partir de sangre bovina hemolizada y coagulada para la detección molecular de Anaplasma spp. Revista Mexicana de Ciencias Pecuarias, 12(2), 653-660. https://doi.org/10.22319/rmcp.v12i2.5635
Martínez, M. C., Arraga-Alvarado, C. M., Triana-Alonso, F. J., Ruiz, J. A., & Gutiérrez, C. N. (2015). Estudio serológico y molecular de Ehrlichia canis en perros de una comunidad del estado Aragua, Venezuela. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú, 26(4), 648-656. https://doi.org/10.15381/rivep.v26i4.11220
McCabe, E. R. B. (1991). Utility of PCR for DNA analysis from dried blood spots on filter paper blotters. PCR Methods and Applications, 1(2), 99-106. https://doi.org/10.1101/gr.1.2.99
McCabe, L. L., & McCabe, E. R. B. (2002). Newborn screening as a model for population screening. Molecular Genetics and
Metabolism, 75(4), 299–307. https://doi.org/10.1016/S1096-7192(02)00005-7
Núñez, L., Rodríguez, M. I., Giménez, G., & Martínez, R. (2018). Evaluación y comparación de dos protocolos de extracción de ADN a partir de tres tipos de muestras de ovinos. Compendio de Ciencias Veterinarias, 11(2), 18-23.
https://doi.org/10.18004/compend.cienc.vet.2021.11.02.18
Núñez Yegros, O. L., Narváez Quiñónez, M. L., Araujo Oviedo, A. M., Giménez Bareiro, G., Florentín Ibarra, I. P., & Ramírez Ayala, L. C. (2025). Detección y caracterización molecular de Anaplasma marginale ADN de muestras de sangre de bovinos provenientes de Paraguay. Revista Investigaciones y Estudios – UNA, 16(2), 6-17.
https://doi.org/10.18004/rdgic.Investig.estud.UNA.2025.diciembre.3016025171
Páez-Triana, L., Muñoz, M., Herrera, G., Moreno-Pérez, D. A., Tafur-Gómez, G. A., Montenegro, D., Patarroyo, M. A., Paniz-Mondolfi, A., & Ramírez, J. D. (2021). Genetic diversity and population structure of Rhipicephalus sanguineus sensu lato across different regions of Colombia. Parasites & Vectors, 14(1), 424. https://doi.org/10.1186/s13071-021-04898-w
Pérez-Macchi, S., Pedrozo, R., Bittencourt, P., & Müller, A. (2019). Prevalence, molecular characterization and risk factor analysis of Ehrlichia canis and Anaplasma platys in domestic dogs from Paraguay. Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases, 62, 31-39. https://doi.org/10.1016/j.cimid.2018.11.015
Silaghi, C., Santos, A. S., Gomes, J., Christova, I., Matei, I. A., Walder, G., Domingos, A., Bell-Sakyi, L., Sprong, H., von Loewenich, F. D., Oteo, J. A., de la Fuente, J., & Dumler, J. S. (2017). Guidelines for the Direct Detection of Anaplasma spp. in Diagnosis and Epidemiological Studies. Vector borne and zoonotic diseases (Larchmont, N.Y.), 17(1),
12–22. https://doi.org/10.1089/vbz.2016.1960
Simon, N., Shallat, J., Wietzikoski, C. W., & Harrington, W. E. (2020). Optimization of Chelex 100 resin-based extraction of genomic DNA from dried blood spots. Biology Methods and Protocols, 5(1), bpaa009. https://doi.org/10.1093/biomethods/bpaa009
Singh, U. A., Kumari, M., & Iyengar, S. (2018). Method for improving the quality of genomic DNA obtained from minute quantities of tissue and blood samples using Chelex 100 resin. Biol Proced Online 20, 12. http://doi.org/10.1186/s12575-018-0077-6
Smit, P. W., Elliott, I., Peeling, R. W., Mabey, D., & Newton, P. N. (2014). An overview of the clinical use of filter paper in the diagnosis of tropical diseases. American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, 90(2), 195-210. https://doi.org/10.4269/ajtmh.13-0463
Downloads
Publicado
Edição
Seção
Licença
Copyright (c) 2026 Alba María Araujo Oviedo, Selva Lucía Amarilla, Jeanette Filippi Dallmann, María de Lourdes Quiñónez Narváez, Lino César Ramírez Ayala, Guillermo Giménez Bareiro, Ingrid Paloma Florentín Ibarra, María Inés Rodríguez Acosta, Olga Lorena Núñez Yegros
Este trabalho está licenciado sob uma licença Creative Commons Attribution 4.0 International License.
