Detección molecular de belactamasas de espectro extendido (BLEE) en enterobacterias aisladas en Asunción
Keywords:
betalactamasa de espectro extendido (BLEE), resistencia a cefalosporina, enterobacteria, reacción en cadena de la polimerasa (PCR).Abstract
Las betalactamasas de espectro extendido (BLEE), son enzimas responsables de la hidrólisis del anillo betalactámico de penicilinas y cefalosporinas, excepto carbapemenes, inhibiendo así su actividad terapéutica. Si bien es posible la detección fenotípica de este mecanismo de resistencia por métodos convencionales, sólo los métodos moleculares permiten la identificación del gen responsable de dicha resistencia. El objetivo de este estudio descriptivo retrospectivo fue identificar los genes blaCTX-M2, blaPER-2, blaSHV y blaTEM, en aislamientos de enterobacterias productoras de BLEE, de muestras clínicas colectadas entre julio 2007 y abril 2008, provenientes de dos hospitales de referencia de Asunción, Paraguay. La detección molecular de los genes se realizó por reacción en cadena de la polimerasa empleando oligonucleótidos específicos. De los 232 aislados BLEE analizados, el 83% (n=192) portó al menos un gen bla, en el 17% (n=40) restante no fue detectado ninguno de los genes incluido en el estudio. Se observaron las siguientes frecuencias: 49% (94/192) blaCTX-M2, 45% (86/192) blaSHV, 40% (77/192) blaTEM y 7% (13/192) blaPER-2. En el 47% (90/192) se detectó más de un gen, siendo la combinación blaCTX-M2+blaTEM+blaSHV, la más frecuente observada en 32 aislados. El blaCTX-M2 como el gen más frecuente en este estudio concuerda con lo reportado en nuestro país y en Argentina. Este es el primer reporte de la presencia de blaTEM y blaSHV en Paraguay. Es de gran importancia el estudio de otros genes codificantes de resistencia, considerando la emergencia de otras BLEE en la región como blaCTX-M15 con actividad predominantemente ceftazidimasa.
Downloads
References
Rivera JM, Rodríguez C, Huayán G, Mercado P. Susceptibilidad a betalactámicos y resistencia por betalactamasas de espectro extendido (BLEE) en Enterobacteriaceae aisladas de reservorios ambientales de un hospital general en Cajamarca, Perú. Rev Med Hered. 2011;22(2):69-75.
Torres L, Gagliotta V, Torres O, Benítez M, Domínguez M, Pedroza R. b-Lactamasas de Espectro Expandido en Enterobacterias aisladas en Centros de Salud de Caracas. Rev. Soc. Ven. Microbiol. 2006;26(2):365-78.
Paterson DL, Bonomo RA. Extended-spectrum β-lactamases: a clinical update. Clin Microbiol Rev. 2005;18(4):657-86.
Godínez AR, Pedroso WH, Hernández RN, Sánchez AP, Alonso ED, Cruz LD. Detección precoz de enterobacterias productoras de betalactamasas de espectro extendido en pacientes graves. Rev Cub Med Int Emerg. 2006; 5(1):1.
Ambler RP. The structure of Beta-lactamases. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 1980; 289(1036):321-31.
Bush K, Jacoby GA, Medeiros AA. A functional classification scheme for beta-lactamases and its correlation with molecular structure. Antimicrob Agents Chemother. 1995; 39(6):1211.
Tafur JD, Torres JA, Villegas MV. Mechanisms of antibiotic resistance in Gram negative bacteria. Infectio. 2008; 12(3):227-32.
Rossolini GM, D’andrea MM, Mugnaioli C. The spread of CTX‐M‐type extended‐spectrum β‐lactamases. Clin Microbiol Infect. 2008; 14(s1):33-41.
Bonnet R. Growing group of extended-spectrum β-lactamases: the CTX-M enzymes. Antimicrob Agents Chemother. 2004; 48(1):1-4.
Chen CJ, Su LH, Lin TY, Huang YC. Molecular analysis of repeated methicillin-resistant Staphylococcus aureus infections in children. PLoS One. 2010; 5(12):e14431.
Muñoz J, García-Rodríguez J. Detección de mecanismos de resistencia. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2003; (21):72-4.
Guillén R, Velázquez G, Lird G, Espínola C, Laconich M, Meyer M et al. Estudio multicéntrico de enterobacterias productoras de betalactamasas de espectro extendido: Detección de Genes blaCTX-M2 y blaPER-2. LabCiencia. 2009;1:12-4.
Zhang K, Sparling J, Chow BL, Elsayed S, Hussain Z, Church DL, Gregson DB, Louie T, Conly JM. New quadriplex PCR assay for detection of methicillin and mupirocin resistance and simultaneous discrimination of Staphylococcus aureus from coagulase-negative staphylococci. J. Clin. Microbiol. 2004; 42(11):4947-55.
Quinteros M, Radice M, Gardella N, Rodriguez MM, Costa N, Korbenfeld D, et al. Extended-spectrumβ-lactamases in Enterobacteriaceae in Buenos Aires, Argentina, public hospitals. Antimicrob Agents Chemother. 2003;47(9):28.
Guzmán Blanco M, Labarca JA, Villegas MV, Gotuzzo E; Latin America Working Group on Bacterial Resistance. Extended spectrum β-lactamase producers among nosocomial Enterobacteriaceae in Latin America. Braz J Infect Dis.2014;18(4):421–33.
Casellas JM. Resistencia a los antibacterianos en América Latina: consecuencias para la infectología. Rev Panam Salud Publica. 2011; 30(6):519–28.
Sennati S, Santella G, Di Conza J, Pallecchi L, Pino M, Ghiglione B, Rossolini GM, Radice M, Gutkind G. Changing epidemiology of extended-spectrum β-lactamases in Argentina: emergence of CTX-M-15. Antimicrob Agents Chemother. 2012; 56(11):6003-5.
Nastro M, Montoto Piazza L, Saposnik E, García S, Barberis C, Vay Carlos et al. Resistencia a cefalosporinas de espectro extendido en enterobacterias sin AmpC inducible: Evaluación de los nuevos puntos de corte. Rev Argent Microbiol. 2012; 44(1):30-5.
Truppia LA, Mollerach A, Di Conza JA, Radice M, Mugna V, Méndez E, Gutkind G. Comparación de tres métodos microbiológicos para la detección de betalactamasas de espectro extendido en enterobacterias aisladas en Santa Fe (Argentina). Enferm Infecc Microbiol Clin 2005; 23(9):525-8.
Hernández Pedrozo W, Ramos Godínez A, Nodarse Hernández, R, Padrón Sánchez, A, De Armas Moreno, E. Resistencia bacteriana en las bacterias productoras de betalactamasas extendidas (BLEE). Rev Cubana de Med Int Emerg. 2006;5(1):256-64.
Ardanuy C. Epidemiología de las betalactamasas plasmídicas de espectro ampliado. Recuperado a partir de: http://seq.es/seq/html/revista_seq/0197/ponens.html
Seral-García C, Pardos de la Gándara M, Castillo-García F. Betalactamasas de espectro extendido en enterobacterias distintas de Escherichiacoli y Klebsiella. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2010; 28(1):12-8.
Gaitán C Sandra L, Espinal M Paula A. Caracterización molecular de Escherichiacoli y Klebsiellapneumoniae productores de ß-lactamasas de espectro extendido en hospitales de la Región Caribe, Colombia. Rev. chil. infectol. 2009; 26(3):239-46.
Bertona E, Radice M, Rodríguez CH, Barberis C, Vay C, Famiglietti A, et al. Caracterización fenotípica y genotípica de la resistencia enzimática a las cefalosporinas de tercera generación en Enterobacter spp. Rev. argent. microbiol. 2005; 37(4):203-8.
Cruz GR, Radice M, Sennati S, Pallecchi L, Rossolini GM, Gutkind G, et al. Prevalence of plasmid-mediated quinolone resistance determinants among oxyimino cephalosporin-resistant Enterobacteriaceae in Argentina. Mem. Inst. Oswaldo Cruz. 2013; 108(7):924-7.
García-Fulgueiras V, Bado I, Mota MI, Robino L, Cordeiro NF, Varela A, et al. Extended-spectrum β-lactamases and plasmid-mediated quinolone resistance in enterobacterial clinical isolates in the paediatric hospital of Uruguay. J Antimicrob Chemother. 2011; 66(8):1725-9.
Bartoloni A, Pallecchi L, Riccobono E, Mantella A, Magnelli D, Di Maggio T, et al. Relentless increase of resistance to fluoroquinolones and expanded‐spectrum cephalosporins in Escherichia coli: 20 years of surveillance in resource‐limited settings from Latin America. Clin Microbiol Infect. 2013; 19(4):356-61.
Melgarejo N, Martinez M, Franco R, Falcón M. Enterobacterias resistentes a Carbapenemes por producción de KPC, aisladas en hospitales de Asunción y Departamento Central. Rev. Salud Pública Para. 2013; 3(1):30-5.
Guillén et al Detección molecular de belactamasas de espectro
Mem. Inst. Investig. Cienc. Salud. 2015;13(2):8-16 16
Morejón García M. Carbapenemases, an actual threat. Rev Clin Esp. 2012; 211(4):187-91.
Bello H, Trabal N, Ibáñez D, Reyes A, Domínguez M, Mella S et al. ß-Lactamasas de familias diferentes a TEM y SHV en cepas de Klebsiella pneumoniae subespecie pneumoniae aisladas en hospitales chilenos. Rev. med. Chile. 2005;133:737-9.
