PCR múltiple para la detección simultánea de los genes mecA y pvl en Staphylococcus spp

Autores/as

  • María Leticia Carpinelli Acevedo IICS-UNA
  • Rosa María Guillén Fretes IICS-UNA
  • Norma Fariña IICS-UNA
  • W Basualdo Hospital General Pediátrico Niños de Acosta Ñú. Ministerio de Salud Pública y Bienestar Social.
  • R Aquino Hospital General Pediátrico Niños de Acosta Ñú. Ministerio de Salud Pública y Bienestar Social.

Palabras clave:

Staphylococcus aureus, Estafilococos coagulasa negativos, meticilino resistencia, gen mecA, gen pvl

Resumen

Este estudio observacional descriptivo de corte transverso tuvo por objetivo estandarizar una PCR múltiple para la detección simultánea de los genes mecA y pvl en Staphylococcus spp. Se emplearon como cepas control: S. aureus ATCC 25923, S. aureus ATCC 43300 y un aislado de S. aureus portador de los genes mecA y pvl. La extracción de ADN se realizó por el método de ebullición. El límite de detección se estableció por medio de diluciones seriadas de ADN. Se determinó la aplicabilidad de la PCR múltiple testando 41 aislados de S. aureus y 51 Estafilococos coagulasa negativo (ECN) previamente caracterizados por métodos fenotípicos en noviembre del año 2009. Los productos de PCR fueron visualizados por electroforesis en gel de agarosa al 2% previa tinción con bromuro de etidio. Los productos de amplificación de la PCR múltiple presentaron tamaño esperado de 533pb y 433pb para los genes mecA y pvl respectivamente, con límites de detección de hasta 0,5 ng/μL. El gen mecA se detectó en 13 (31,7%) aislados de S. aureus y en 29 (56,7%) ECN. El gen pvl se detectó en 2 (4,9%) S. aureus y no fue detectado en ECN. La presencia del gen mecA tuvo 100% de concordancia con los métodos fenotípicos. Esta técnica es una herramienta útil en la confirmación de cepas de Estafilococos meticilino resistentes e identificación del gen pvl, además de ser relativamente sencilla con la ventaja de detectar ambos genes en una sola reacción.

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Publicado

2012-06-01

Cómo citar

Carpinelli Acevedo, M. L. ., Guillén Fretes, R. M. ., Fariña, N. ., Basualdo, W., & Aquino, R. (2012). PCR múltiple para la detección simultánea de los genes mecA y pvl en Staphylococcus spp. Memorias Del Instituto De Investigaciones En Ciencias De La Salud, 10(1). Recuperado a partir de https://revistascientificas.una.py/index.php/RIIC/article/view/1701

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