Detección de Cannabinoides en productos comerciales a base de
cáñamo (Cannabis sativa), disponibles en el mercado paraguayo
mediante Cromatografía Líquida de Alta Resolución
1Universidad Nacional de Asunción, Centro Multidisciplinario de Investigaciones Tecnológicas,
Campus UNA, San Lorenzo, Paraguay
2Universidad Nacional de Asunción, Facultad de Ciencias Químicas, Campus UNA, San Lorenzo,
Paraguay
*autor por correspondencia: hnakayama@rec.una.py
Detección de Cannabinoides en productos comerciales a base de cáñamo (Cannabis sativa),
disponibles en el mercado paraguayo mediante Cromatografía Líquida de Alta Resolución. En
el Paraguay, una variedad de la especie Cannabis sativa L., denominado comúnmente “cáñamo”, con
un contenido de tetrahidrocannabinol (THC) inferior al 0,5% (p/p) se encuentra regulado mediante el
decreto N°2725 desde el año 2019, a consecuencia del creciente interés por el alto valor nutricional
del aceite de las semillas de esta variedad, ha aumentado la venta de productos a base de cáñamo
en el mercado, surgiendo así la necesidad de realizar un control de calidad en cuanto al contenido de
cannabinoides en estos productos. Este estudio tuvo como objetivo principal identicar la presencia
de cannabinoides en productos comerciales mediante cromatografía líquida de alta resolución. Se
llevó a cabo el análisis de 9 productos a base de aceite de semilla de cáñamo, que incluyeron cosmé-
ticos y té. Los resultados arrojaron que en ninguna de las muestras se observaron picos con tiempos
de retenciones similares al del estándar de THC, sin embargo, en el 44% de las muestras analizadas
se observaron la presencia de un pico con un tiempo de retención similar al de la señal del estándar
de cannabidiol (CBD). La metodología analítica empleada fue la más indicada para el análisis de las
muestras de té, no así para el análisis de productos cosméticos, por lo que se sugiere optimizar el
método de extracción para este tipo de productos.
Palabras Clave: Cáñamo, productos comerciales, cannabinoides, HPLC
Detection of Cannabinoids based on hemp (Cannabis sativa), in commercial products available
in the Paraguayan market by High Performance Liquid Chromatography. In Paraguay, a variety of
the species Cannabis sativa L., commonly called “hemp”, with a tetrahydrocannabinol (THC) content
lower than 0.5% (w/w) is regulated by decree N°2725 since 2019. Due to a growing interest in the high
nutritional value of the oil obtained from hemp seeds, commercial sales of hemp-based products have
increased, and there is need for quality control regarding the cannabinoid content of these products.
The main objective of this study was to identify the presence of cannabinoids in commercial products
Steviana, Vol. 16 (1), 2024 pp.22-32
Original recibido el 13/11/2023
Aceptado el 08/05/2024
Todo el contenido de esta revista está bajo una
Licencia Creative Commons
Artículo Original /Original Article
Vera Alvariza, M.1,2; Benítez Penayo, E.1,2; Samudio Oggero, A.1 ; Nakayama, H. D.1*
DOI: https://doi.org/10.56152/StevianaFacenV16N1A3_2024
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Steviana Vol. 16(1), 2024
by means of high-performance liquid chromatography. Nine hemp seed oil-based products, including
cosmetics and tea, were analyzed. The results showed that none of the samples showed peaks
with retention times similar to the THC standard; however, 44% of the samples analyzed showed the
presence of a peak with a retention time similar to that of the cannabidiol (CBD) standard signal. The
analytical methodology used was the most suitable for the analysis of tea samples, but not for the
analysis of cosmetic products, so the present study suggests to optimize the extraction method for this
type of products.
Key words: Hemp, cannabinoids, commercial products, HPLC
INTRODUCCIÓN
Cannabis sativa L. clasicada botánicamente
por Carlos Linneo en el año 1753, es una plan-
ta anual, dioica de la familia Cannabaceae, es
procedente de Asia, aunque actualmente se la
encuentra en regiones tropicales y subtropica-
les de todo el mundo. Tiene un rango de altura
que puede ir de 1,6 a 6 metros y sus hojas son
de color verde oscuro, tienen forma alargada y
bordes dentados. Recubriendo las hojas, tallo y
principalmente en las ores femeninas y las brác-
teas (pequeñas hojas que rodean las semillas)
de C. sativa se encuentran unas protuberancias
epidérmicas denominadas ‘‘tricomas’’, en estas
estructuras se almacena una resina que contiene
metabolitos secundarios como los cannabinoides,
un grupo de compuestos casi exclusivos de esta
planta y terpenos que le otorgan su peculiar aro-
ma a esta especie vegetal (Barrales-Cureño et al.,
2020; Bonini et al., 2018; Andre et al., 2016; Án-
geles López et al., 2014).
C. sativa tiene una composición química
compleja, se han identicado más de 500 com-
puestos químicos incluyendo a cannabinoides,
terpenos, avonoides, estilbenos, alcaloides, lig-
nanamidas y amidas fenólicas (Ángeles López
et al., 2014). Los cannabinoides corresponden
a un grupo formado por más de 100 compues-
tos de naturaleza terpefenólica C21o C22 (formas
carboxiladas) sintetizados predominantemente
por C. sativa. Dentro de este grupo se destacan
por ser los más abundantes el Δ9-tetrahidrocan-
nabinol (Δ9-THC) el principal responsable de los
efectos psicoactivos de C. sativa y el cannabidiol
(CBD) que no posee propiedades psicoactivas. El
cannabinol (CBN) es un compuesto que resulta
de la degradación del THC por lo que su efecto
psicoactivo es bastante menor, siendo sólo una
décima parte de lo que se menciona para el THC.
Asimismo, otros compuestos pertenecientes al
grupo de los cannabinoides son el Δ8-tetrahidro-
cannabinol formado por la isomerización del Δ9-
THC, el cannabicromeno (CBC), el cannabigerol
(CBG) y el cannabiciclol (Barrales-Cureño et al.,
2020; Andre et al., 2016).
En la planta fresca los cannabinoides
principales como el Δ9- THC y el CBD se
producen en sus formas ácidas (carboxila-
das) como ácido tetrahidrocannabinólico
(ATHC) y ácido cannabidiólico (ACBD) y son
sintetizados a partir del ácido cannabigerólico
(ACBG), su precursor común, gracias a la acción
de cannabinoides sintasas. Estos compuestos se
almacenan en la resina producida en los tricomas
glandulares los cuales abundan en las ores fe-
meninas, en hojas y tallo están en menor cantidad
y, al contrario, están ausentes en las semillas y
raíces. Entonces, el contenido de cannabinoides
varía en paralelo con la distribución de los trico-
mas glandulares, según la parte de la planta que
se examine. Posteriormente, de forma no enzimá-
tica por temperatura o exposición a la luz ocurre
la descarboxilación y transformación de los áci-
dos cannabinoides a sus correspondientes formas
neutras como Δ9-THC y CBD, durante el secado
y almacenamiento del material vegetal pero prin-
cipalmente durante el consumo de los productos
24
Vera Alvariza, M. et al “Detección de Cannabinoides en productos comerciales a base de cáña-
mo (Cannabis sativa)”
del Cannabis (calentamiento) (Farinon et al.,
2020; Martínez et al., 2020; ElSohly et al., 2017;
Andre et al., 2016; De Backer et al., 2012). En la
Figura 1 se puede observar un esquema general
de la síntesis de los principales cannabinoides.
Es bien sabido que C. sativa es una planta
controversial en cuanto a la presencia de THC
debido a que este compuesto con propiedades
psicoactivas cuenta con importantes limitaciones
legales, siendo considerado una sustancia ilícita
en la mayoría de los países. Sin embargo, es posi-
ble clasicar y distinguir al cannabis en distintas
variedades que dieren en el porcentaje (%) de
THC lo cual dene sus distintos propósitos (O-
cina de las Naciones Unidas contra la Droga y el
Delito, 2010; García y Sánchez, 2006).
Cannabis tipo droga (marihuana), se caracte-
riza por un alto contenido en THC (entre 5 y 20%
dependiendo de la presentación) y es de donde
se deriva su uso con nes recreativos (García y
Sánchez, 2006).
Cannabis tipo bra (cáñamo), su contenido
en THC es bajo, inferior al 0,5% (límite superior
3
Figura 1. Ruta sintética de principales cannabinoides. ΔT, calentamiento; [O], oxidación; [I],
isomerización. Adaptado de De Backer et al. (2012)
Es bien sabido que C. sativa es una planta controversial en cuanto a la presencia de THC debido a que
este compuesto con propiedades psicoactivas cuenta con importantes limitaciones legales, siendo
considerado una sustancia ilícita en la mayoría de los países. Sin embargo, es posible clasificar y distinguir
al cannabis en distintas variedades que difieren en el porcentaje (%) de THC lo cual define sus distintos
propósitos (Oficina de las Naciones Unidas contra la Droga y el Delito, 2010; García y Sánchez, 2006).
- Cannabis tipo droga (marihuana), se caracteriza por un alto contenido en THC (entre 5 y 20%
dependiendo de la presentación) y es de donde se deriva su uso con fines recreativos (García y Sánchez,
2006).
- Cannabis tipo fibra (cáñamo), su contenido en THC es bajo, inferior al 0,5% (límite superior legal en
Paraguay) y se cultiva con fines industriales (García y Sánchez, 2006).
- Cannabis medicinal, debido a sus niveles más elevados del componente no psicoactivo CBD que de
THC se utiliza con fines médicos en el tratamiento de diversas afecciones y enfermedades incluyendo el
dolor, las epilepsias y las enfermedades neurodegenerativas (Amin y Ali, 2019).
Cáñamo (Cannabis industrial)
El cáñamo o cannabis industrial como variedad no psicoactiva de C. sativa se cultiva ampliamente
alrededor del mundo incluyendo países como Estados Unidos, Canadá, China y África principalmente para
la obtención de fibra a partir de su tallo y de semillas que se pueden utilizar enteras o descascaradas. Sin
embargo, prácticamente a la totalidad de la planta de cáñamo se le puede dar distintos usos, abarcando así
múltiples y bien diversos campos de aplicación desde la agricultura hasta las industrias de alimentos,
cosméticos, farmacéuticas, construcción y la fitorremediación (Farinon et al., 2020).
Las semillas de cáñamo al pasar por un proceso de prensado en frío permiten la obtención de harinas y
aceites de alto valor nutricional que pueden ser utilizados en el campo de los alimentos y cosméticos. Así
también extractos puros de THC y CBD obtenidos de las flores de la planta de cáñamo son componentes
valiosos en la elaboración de cosméticos como aceites esenciales y productos farmacéuticos. Además, el tallo
de la planta de cáñamo sirve como fuente de fibra la cual es útil en la elaboración de papeles, tejidos y prendas
Figura 1. Ruta sintética de principales cannabinoides. ΔT, calentamiento; [O], oxidación; [I],
isomerización. Adaptado de De Backer et al. (2012)
legal en Paraguay) y se cultiva con nes indus-
triales (García y Sánchez, 2006).
Cannabis medicinal, debido a sus niveles más
elevados del componente no psicoactivo CBD
que de THC se utiliza con nes médicos en el tra-
tamiento de diversas afecciones y enfermedades
incluyendo el dolor, las epilepsias y las enferme-
dades neurodegenerativas (Amin y Ali, 2019).
Cáñamo (Cannabis industrial)
El cáñamo o Cannabis industrial como varie-
dad no psicoactiva de C. sativa se cultiva amplia-
mente alrededor del mundo incluyendo países
como Estados Unidos, Canadá, China y África
principalmente para la obtención de bra a partir
de su tallo y de semillas que se pueden utilizar
enteras o descascaradas. Sin embargo, práctica-
mente a la totalidad de la planta de cáñamo se
le puede dar distintos usos, abarcando así múlti-
ples y bien diversos campos de aplicación desde
la agricultura hasta las industrias de alimentos,
cosméticos, farmacéuticas, construcción y la to-
rremediación (Farinon et al., 2020).
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Steviana Vol. 16(1), 2024
Las semillas de cáñamo al pasar por un pro-
ceso de prensado en frío permiten la obtención
de harinas y aceites de alto valor nutricional que
pueden ser utilizados en el campo de los alimen-
tos y cosméticos. Así también extractos puros de
THC y CBD obtenidos de las ores de la planta
de cáñamo son componentes valiosos en la ela-
boración de cosméticos como aceites esenciales
y productos farmacéuticos. Además, el tallo de
la planta de cáñamo sirve como fuente de bra
la cual es útil en la elaboración de papeles, te-
jidos y prendas de vestir. De igual manera, otro
campo de aplicación interesante del cáñamo es la
torremediación ya que estudios anteriores han
reportado su capacidad para remover metales y
otros contaminantes de suelos contaminados. En-
tonces, teniendo en cuenta todas las propiedades
mencionadas anteriormente es que la planta de
cáñamo es considerada una planta muy versátil
que puede ser cultivada con múltiples propósitos
(Crini et al., 2020; Farinon et al., 2020).
Legislación paraguaya. Cáñamo industrial
A nivel país, la regulación del cultivo del cá-
ñamo industrial data del año 2019 en el cual fue
promulgado el decreto N°2725 que establece las
condiciones generales para la producción del cá-
ñamo industrial (no psicoactivo) que se entiende
como la planta, sumidades oridas con o sin fruto
de la planta de cáñamo, cuyo contenido de THC
es inferior a 0,5% (peso seco de la planta). Pos-
teriormente, en el año 2020 mediante el decreto
N°3999 fue creado el programa nacional para
la promoción, fomento, cultivo, desarrollo de la
producción, comercialización, investigación del
cáñamo industrial e incluso se lo declaró como
cultivo de interés nacional. La máxima autoridad
de aplicación de estos decretos es el Ministerio
de Agricultura y Ganadería (MAG). Es importan-
te también tener en cuenta que más recientemen-
te, durante el año 2021 mediante la resolución
N°1634 del MAG fue aprobado el procedimiento
para la autorización de investigaciones cientícas
relacionadas al cáñamo industrial.
En la actualidad y como resultado de la le-
gislación que autoriza y regula la producción del
cáñamo industrial, Paraguay se ha convertido en
uno de los mayores productores a nivel mundial y,
de hecho, también como consecuencia del interés
creciente por el cáñamo y sus benecios es que se
ha observado un aumento en la venta de produc-
tos a base de cáñamo en el mercado paraguayo.
Debido a esto surge la necesidad de realizar con-
troles de calidad a estos productos que declaran
como parte del producto C. sativa, en cuanto al
contenido de cannabinoides (THC, CBD) en los
mismos. Por lo expuesto, este estudio tuvo como
objetivo principal identicar la presencia de can-
nabinoides en productos comerciales mediante
cromatografía líquida de alta resolución.
MATERIALES Y MÉTODOS
Obtención de productos comerciales a base de
cáñamo
Fueron adquiridos en un supermercado loca-
lizado en la ciudad de Asunción, Dpto. Central,
nueve productos de origen paraguayo que in-
cluían cosméticos (n= 7) como shampoo, acondi-
cionador, crema de tratamiento capilar, perfume
capilar, crema corporal, perfume corporal, jabón
de tocador y té (n= 2) para la identicación de
cannabinoides mediante HPLC (High-Perfor-
mance Liquid Chromatography). En su etiqueta
declaraban contener aceite de semilla de cáñamo
en el caso de los cosméticos y en el caso del té,
estos declaraban contener aceite de semilla de cá-
ñamo y semillas de cáñamo descortezadas como
ingredientes. Los productos fueron numerados
de L1 a L9 (Tabla 1). Una vez en el laboratorio,
los productos fueron almacenados a temperatura
ambiente.
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Vera Alvariza, M. et al “Detección de Cannabinoides en productos comerciales a base de cáña-
mo (Cannabis sativa)”
4
de vestir. De igual manera, otro campo de aplicación interesante del cáñamo es la fitorremediación ya que
estudios anteriores han reportado su capacidad para remover metales y otros contaminantes de suelos
contaminados. Entonces, teniendo en cuenta todas las propiedades mencionadas anteriormente es que la
planta de cáñamo es considerada una planta muy versátil que puede ser cultivada con múltiples propósitos
(Crini et al., 2020; Farinon et al., 2020).
Legislación paraguaya. Cáñamo industrial
A nivel país, la regulación del cultivo del cáñamo industrial data del año 2019 en el cual fue promulgado
el decreto N°2725 que establece las condiciones generales para la producción del cáñamo industrial (no
psicoactivo) que se entiende como la planta, sumidades floridas con o sin fruto de la planta de cáñamo, cuyo
contenido de THC es inferior a 0,5% (peso seco de la planta). Posteriormente, en el año 2020 mediante el
decreto N°3999 fue creado el programa nacional para la promoción, fomento, cultivo, desarrollo de la
producción, comercialización, investigación del cáñamo industrial e incluso se lo declaró como cultivo de
interés nacional. La máxima autoridad de aplicación de estos decretos es el Ministerio de Agricultura y
Ganadería (MAG). Es importante también tener en cuenta que más recientemente, durante el año 2021
mediante la resolución N°1634 del MAG fue aprobado el procedimiento para la autorización de
investigaciones científicas relacionadas al cáñamo industrial.
En la actualidad y como resultado de la legislación que autoriza y regula la producción del cáñamo
industrial, Paraguay se ha convertido en uno de los mayores productores a nivel mundial y, de hecho, también
como consecuencia del interés creciente por el cáñamo y sus beneficios es que se ha observado un aumento
en la venta de productos a base de cáñamo en el mercado paraguayo. Debido a esto surge la necesidad de
realizar controles de calidad a estos productos que declaran como parte del producto C. sativa, en cuanto al
contenido de cannabinoides (THC, CBD) en los mismos. Por lo expuesto, este estudio tuvo como objetivo
principal identificar la presencia de cannabinoides en productos comerciales mediante cromatografía líquida
de alta resolución.
MATERIALES Y MÉTODOS
Obtención de productos comerciales a base de cáñamo
Fueron adquiridos en un supermercado localizado en la ciudad de Asunción, Dpto. Central, nueve
productos de origen paraguayo que incluían cosméticos (n= 7) como shampoo, acondicionador, crema de
tratamiento capilar, perfume capilar, crema corporal, perfume corporal, jabón de tocador y té (n= 2) para la
identificación de cannabinoides mediante HPLC (High-Performance Liquid Chromatography). En su
etiqueta declaraban contener aceite de semilla de cáñamo en el caso de los cosméticos y en el caso del té,
estos declaraban contener aceite de semilla de cáñamo y semillas de cáñamo descortezadas como
ingredientes. Los productos fueron numerados de L1 a L9 (Tabla 1). Una vez en el laboratorio, los productos
fueron almacenados a temperatura ambiente.
Tabla 1. Productos comerciales a base de cáñamo con sus respectivos códigos de identificación.
Tipo de producto
Código
Shampoo
L1
Acondicionador
L2
Crema de tratamiento capilar
L3
Perfume capilar
L4
Crema corporal
L5
Jabón de tocador
L6
Perfume corporal
L7
Té digestivo
L8
Té calmante
L9
Preparación de las muestras
Las muestras comerciales fueron preparadas según lo descrito por Menezes et al. (2012), se diluyeron con
metanol grado HPLC (solvente de extracción) en una proporción 1:4 (producto: metanol) con excepción de
Tabla 1. Productos comerciales a base de cáñamo con sus respectivos códigos de identicación
Preparación de las muestras
Las muestras comerciales fueron preparadas
según lo descrito por Menezes et al. (2012), se
diluyeron con metanol grado HPLC (solvente
de extracción) en una proporción 1:4 (producto:
metanol) con excepción de las muestras L2 y L3
para las cuales se utilizó el doble de solvente, es
decir, se diluyeron en proporción 1:8 (produc-
to: metanol). Luego, se agitaron durante apro-
ximadamente 30 segundos y se dejaron reposar
en viales de tamaño apropiado. Se protegieron
a las muestras de la luz durante la preparación.
Con respecto a las muestras de té (L8 y L9) pri-
meramente se procedió a realizar una infusión;
para esto se colocó el saquito de té en un vaso
de precipitado con 200 mL de agua a temperatu-
ra de 100 °C, se dejó infusionar por 5 minutos y
luego se procedió de la misma manera que con
las demás muestras para su preparación. Poste-
riormente las muestras fueron ltradas a través
de un ltro de PTFE (politetrauoroetileno) de
0,45 μm (Whatman, EE.UU) previamente activa-
do con metanol. Se obtuvieron aproximadamente
2 mL de cada muestra lista para su inyección en
el equipo de HPLC las cuales se almacenaron en
viales de color ámbar de tamaño apropiado.
Preparación de las soluciones estándar
Las soluciones estándares certicadas de
THC y CBD (Sigma-Aldrich, EE.UU) conteni-
das en ampollas de concentración 1 mg/mL por
separado se prepararon diluyendo la totalidad
de las ampollas con metanol grado HPLC (J.T.
Baker, EE.UU) en un matraz de 10 mL. Luego
se ltraron a través de un ltro de jeringa PTFE
de 0,45 μm (Whatman, EE.UU) previamente ac-
tivado con metanol y se almacenaron en viales de
color ámbar.
Preparación de la fase móvil
Se preparó una solución de fosfato dipotásico
(Merck, Alemania) 5mM disolviendo los gramos
necesarios de sal en agua desionizada y se lle-
vó a pH 3,45 utilizando HCl 12M (J.T. Baker,
EE.UU). Posteriormente, se mezcló acetonitrilo
grado HPLC (J.T.Baker, EE.UU) con el buer
fosfato pH 3,45 en relación 75:25 (v/v). La mez-
cla obtenida fue ltrada utilizando un equipo de
ltración al vacío y se almacenó en un frasco ám-
bar cerrado.
Condiciones para el análisis cromatográco
HPLC-UV
Para la identicación de cannabinoides en
muestras de productos a base de cáñamo se utili-
zó el sistema HPLC Prominence LC-20AT (Shi-
madzu corporation, Japón) equipado el detector
UV-Vis (SPD-20A). Se utilizó una columna C18
(5 μm, tamaño de partícula) de 250 x 4,6 mm
(Restek, EE.UU) que se mantuvo a una tempe-
ratura de 53 °C. La fase móvil utilizada fue la
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Steviana Vol. 16(1), 2024
mezcla de acetonitrilo y buer fosfato a pH 3,45
en proporción 75:25 (v/v) con elución isocráti-
ca a un ujo de 0,8mL/min. La longitud de onda
de detección UV se jó en 210 nm. El volumen
de inyección de los estándares o muestras fue
de 20 μL y el tiempo total de análisis para cada
estándar o muestra de 30 minutos. Cabe resaltar
que las condiciones en las que se realizaron los
análisis cromatográcos fueron estandarizadas
previamente por Ayala (2021) en el laboratorio
del Centro Multidisciplinario de Investigaciones
Tecnológicas (CEMIT) para el análisis de THC y
CBD. Para la adquisición de los datos e integra-
ción de los picos fue utilizado el software LabSo-
lutions (Shimadzu, Japón) versión 5.87.
Análisis estadístico
Se utilizó estadística descriptiva para el análi-
sis de los resultados y la presentación de los mis-
mos se realizó en tablas y guras.
Consideraciones éticas
Los productos comerciales analizados en este
trabajo fueron nombrados utilizando códigos
alfanuméricos por lo cual se mantuvo el anoni-
mato de las empresas de las cuales provienen y
se aseguró la condencialidad de los resultados.
Los reactivos y residuos generados recibieron el
debido tratamiento para su correcta eliminación
asegurando la integridad del medio ambiente.
Los estándares THC y CBD fueron adquiridos en
una distribuidora local autorizada y mantenidos
en todo momento dentro de las instalaciones del
CEMIT siendo su uso estrictamente analítico.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Preparación de las muestras y extracción de
cannabinoides
La metodología descrita por Menezes et al.
(2012) fue seleccionada para la preparación de
las muestras, utilizando un solvente orgánico
como el metanol que permita la extracción de
los cannabinoides THC y CBD de los diferentes
tipos de matrices (shampoo, acondicionador, cre-
ma, perfume, etc.). En el caso de las muestras L2
y L3 se utilizó el doble de solvente (8 mL) debido
a las características de estas muestras, su formu-
lación además contiene excipientes que dicul-
taban la ltración a través del ltro de 0,45 μm.
Cabe resaltar que se decidió utilizar metanol
como solvente de extracción debido a que en un
estudio previo realizado por Hsu et al.(2021)an
efcient and reliable analytical method for THC
and other cannabinoids in cannabis-infused cos-
metic products was in need. A liquid chromato-
graphytandem mass spectrometry (LC-MS/MS
reportaron un buen rendimiento de extracción
utilizando metanol en comparación con otros sol-
ventes en productos cosméticos a base de acei-
te de semilla de cáñamo similares a los tipos de
muestras analizados en este estudio, también te-
niendo en cuenta que la mayoría de las muestras
a ser analizadas en este trabajo incluían produc-
tos cosméticos.
Análisis de cannabinoides en productos co-
merciales a base de cáñamo mediante HPLC
Se llevó a cabo el análisis por HPLC de 9
productos comerciales que incluyeron shampoo
(n=1), acondicionador (n=1), jabón de tocador
(n=1), crema (n=2), perfume (n=2) y té (n=2).
Cada una de las muestras fueron analizadas por
triplicado. Los estándares de THC y CBD fueron
analizados en condiciones idénticas a las mues-
tras.
Teniendo en cuenta los cromatogramas del
estándar de CBD y del estándar de THC (Figura
2) se pudo demostrar que en las condiciones em-
pleadas en este trabajo el CBD tuvo un tiempo de
retención de alrededor de 12,2 minutos y el THC
tiene un tiempo de retención de alrededor de 21,7
minutos.
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Vera Alvariza, M. et al “Detección de Cannabinoides en productos comerciales a base de cáña-
mo (Cannabis sativa)”
En los cromatogramas del 44% (4/9) de las
muestras analizadas (L1, L3, L6 y L7) correspon-
dientes a shampoo, crema de tratamiento capilar,
jabón de tocador y perfume corporal respectiva-
mente, se observó un pico con un tiempo de re-
tención similar al tiempo de retención del pico
del estándar de CBD como se puede observar en
la tabla 2 y en la gura 3. Estos resultados coin-
6
Preparación de las muestras y extracción de cannabinoides
La metodología descrita por Menezes et al. (2012) fue seleccionada para la preparación de las muestras,
utilizando un solvente orgánico como el metanol que permita la extracción de los cannabinoides THC y CBD
de los diferentes tipos de matrices (shampoo, acondicionador, crema, perfume, etc.). En el caso de las
muestras L2 y L3 se utilizó el doble de solvente (8 mL) debido a las características de estas muestras, su
formulación además contiene excipientes que dificultaban la filtración a través del filtro de 0,45 μm.
Cabe resaltar que se decidió utilizar metanol como solvente de extracción debido a que en un estudio
previo realizado por Hsu et al.(2021) reportaron un buen rendimiento de extracción utilizando metanol en
comparación con otros solventes en productos cosméticos a base de aceite de semilla de cáñamo similares a
los tipos de muestras analizados en este estudio, también teniendo en cuenta que la mayoría de las muestras
a ser analizadas en este trabajo incluían productos cosméticos.
Análisis de cannabinoides en productos comerciales a base de cáñamo mediante HPLC
Se llevó a cabo el análisis por HPLC de 9 productos comerciales que incluyeron shampoo (n=1),
acondicionador (n=1), jabón de tocador (n=1), crema (n=2), perfume (n=2) y té (n=2). Cada una de las
muestras fueron analizadas por triplicado. Los estándares de THC y CBD fueron analizados en condiciones
idénticas a las muestras.
Teniendo en cuenta los cromatogramas del estándar de CBD y del estándar de THC (Figura 2) se pudo
demostrar que en las condiciones empleadas en este trabajo el CBD un tiempo de retención de alrededor de
12,2 minutos y el THC tiene un tiempo de retención de alrededor de 21,7 minutos.
Figura 2. Cromatogramas de (a) estándar de CDB y (b) estándar de THC
En los cromatogramas del 44% (4/9) de las muestras analizadas (L1, L3, L6 y L7) correspondientes a
shampoo, crema de tratamiento capilar, jabón de tocador y perfume corporal respectivamente, se observó un
pico con un tiempo de retención similar al tiempo de retención del pico del estándar de CBD como se puede
observar en la tabla 2 y en la figura 3. Estos resultados coinciden con el estudio realizado por Hsu y
colaboradores en el que se detectó el compuesto CBD en el 38% (34/90) de muestras cosméticas que
contenían como ingrediente aceite de semilla de cáñamo (Hsu et al., 2021). No obstante, cabe resaltar que si
bien la técnica HPLC-UV utilizada en el presente trabajo mediante el parámetro de tiempo de retención
permite el análisis cualitativo y así la identificación del compuesto, se requiere realizar una confirmación de
la identidad (Skoog et al., 2008).
Figura 2. Cromatogramas de a) estándar de CDB y b)
estándar de THC
ciden con el estudio realizado por Hsu y colabo-
radores en el que se detectó el compuesto CBD
en el 38% (34/90) de muestras cosméticas que
contenían como ingrediente aceite de semilla de
cáñamo (Hsu et al., 2021). No obstante, cabe re-
saltar que si bien la técnica HPLC-UV utilizada
en el presente trabajo mediante el parámetro de
tiempo de retención permite el análisis cualita-
tivo y así la identicación del compuesto, se re-
quiere realizar una conrmación de la identidad
(Skoog et al., 2008).
Con respecto a los resultados del análisis de
las muestras L2, L4, L5 (Figura 4), L8 y L9 (Fi-
gura 5) pertenecientes a acondicionador, perfume
capilar, crema corporal, té digestivo y té calman-
te, respectivamente, en los cromatogramas no se
observaron picos con tiempos de retención simi-
lar al tiempo de retención de la señal del estándar
de CBD.
La detección de CBD en productos que tie-
nen como ingrediente el aceite de semilla de
cáñamo puede deberse a variedades de cáñamo
con alto contenido de este compuesto (Rupasin-
7
Tabla 2. Valores de tiempo de retención del estándar de CBD y de los picos de las muestras a un tiempo de
12 minutos
Muestra
Tiempo de retención (minutos)
Estándar de CBD 1
12,234
Estándar de CBD 2
12,231
Estándar de CBD 3
12,126
L1
12,587
12,594
12,592
L3
12,325
12,319
12,317
L6
12,591
12,583
12,589
L7
12,448
12,456
12,462
Tabla 2. Valores de tiempo de retención del estándar de CBD y de los picos de
las muestras a un tiempo de 12 minutos
29
Steviana Vol. 16(1), 2024
Muestra
Tiempo de retención (minutos)
Estándar de CBD 1
12,234
Estándar de CBD 2
12,231
Estándar de CBD 3
12,126
L1
12,587
12,594
12,592
L3
12,325
12,319
12,317
L6
12,591
12,583
12,589
L7
12,448
12,456
12,462
ghe et al., 2020). Además, los niveles de CBD
pueden variar debido a las diferentes condiciones
de cultivo, el tiempo de cosecha, la variabilidad
genética de las plantas de cáñamo que inuyen
en la composición de cannabinoides (Hsu et al.,
2021)Es importante mencionar que, en Paraguay
el decreto N°2725 que regula la producción del
cáñamo industrial no hace mención con respecto
a los niveles de CBD.
Por otro lado, en los cromatogramas del 100%
(9/9) de las muestras analizadas no se observó
ningún pico con tiempo de retención similar al
tiempo de retención del estándar de THC, lo que
podría indicar la ausencia de dicho compuesto.
Esto concuerda con el hecho de que las varieda-
des de cáñamo autorizadas en Paraguay para la
producción de semillas son aquellas con un nivel
de THC inferior al 0,5% (p/p) por lo cual este
compuesto debería estar ausente o bien, en canti-
dades muy bajas o indetectables en los productos
a base de aceite de semilla de cáñamo. Conside-
rando también que los cannabinoides se sinteti-
zan y almacenan en las estructuras glandulares de
la planta (Rupasinghe et al., 2020).
Cabe resaltar que en cuanto a productos cos-
méticos (L1 a L7) en los cromatogramas de las
muestras (Figuras 3 y 4) se observó la presencia
Figura 3. Cromatogramas de muestras cosméticas a) L1, b) L3, c) L6 y d) L7
Figura 4. Cromatogramas de muestras cosméticas a)
L2, b) L4 y c) L5
30
Vera Alvariza, M. et al “Detección de Cannabinoides en productos comerciales a base de cáña-
mo (Cannabis sativa)”
Figura 5. Cromatogramas de muestras de té a) L8 y
b) L9
de varios picos con tiempos de retención distin-
tos al del estándar de THC y CBD. Esto indicaría
que otros compuestos presentes en estas muestras
absorben en la longitud de onda empleada en este
trabajo, resaltando la propia naturaleza compleja
de esta clase de productos y la presencia de exci-
pientes en los mismos. En cuanto a las muestras
de té, en los cromatogramas correspondientes
(Figura 5) prácticamente no se observó la presen-
cia de picos con tiempos de retención distintos al
de los estándares de THC y CBD, lo cual sugiere
que la metodología utilizada fue más adecuada
para las muestras de té.
CONCLUSIONES
En este estudio se logró realizar el análisis de
cannabinoides en productos comerciales a base
de aceite de semilla de cáñamo. No se identicó
la presencia de THC, el compuesto psicoactivo
de C. sativa, considerado ilícito en Paraguay en
ninguna de las muestras analizadas. Con respecto
al CBD, el compuesto sin propiedades psicoacti-
vas, se observó en los cromatogramas correspon-
dientes, la presencia de un pico con un tiempo
de retención similar al de la señal del estándar
de CBD.
Se sugiere evaluar otros métodos de extrac-
ción teniendo en cuenta los diferentes tipos de
productos para minimizar interferencias por par-
te de otras sustancias, de manera a poder utilizar
esta metodología analítica para la identicación y
cuanticación de THC y CBD en productos que
contengan aceite de semilla de cáñamo.
APORTES DE LOS AUTORES
Todos los actores participaron de los ensayos,
evaluaciones y escritura del manuscrito.
CONFLICTO DE INTERÉS
Los autores declaran no presentar conicto de
interés.
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